Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК/РНК) в биологическом материале (пробе).
ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) – разновидность метода ПЦР, при котором детекция ПЦР-продукта происходит по мере его накопления, т.е. после каждого цикла амплификации.
Особенности
Микрочиповый амплификатор нуклеиновых кислот «Ариадна»
- Позволяет проводить ПЦР-РВ в ячейках микрочипа с лиофилизированными компонентами ПЦР-смеси;
- Позволяет последовательно проводить обратную транскрипцию (ОТ-ПЦР) и ПЦР-РВ на микрочипе (необходимо, если в качестве пробы используется выделенная РНК).
Микрочип
- Стандартная модификация микрочипа содержит 30 ячеек (микрореакторов) с лиофилизированными ПЦР-смесями;
- Реакционная зона выполнена из кремния или алюминия;
- Использование материалов с высокой теплопроводностью и малый объем ПЦР-смеси позволяют сократить время анализа;
- Гидрофильная поверхность ячеек облегчает и ускоряет внесение пробы внутрь ячеек;
- Гидрофобная поверхность вне ячеек предотвращает вытекание пробы за границы ячейки;
- Объем ячейки 1.2 мкл.
Подготовка пробы и проведение ПЦР-анализа
- Образцы ДНК/РНК выделяются из отобранного пат. материала с использованием коммерческих наборов, согласно инструкциям;
- Выделенные образцы ДНК/РНК дозируются в ячейки микрочипа;
- Микрочип помещается в прибор;
- С помощью ПО настраивается протокол термоциклирования и запускается анализ;
- Аналитический сигнал, создаваемый ПЦР-продуктами, в реальном времени выводится на экран монитора в виде графика.
Микрочип с лиофилизированными ПЦР-смесями предназначен для однократного использования.
Хранение и транспортировка микрочипов осуществляется при комнатной температуре!
